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科學(xué)家成功研發(fā)新一代光遺傳學(xué)工具

所屬分類:時(shí)事聚焦    發(fā)布時(shí)間: 2021-10-11    作者:西安橡膠制品
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近日,華東師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院研究員葉海峰團(tuán)隊(duì)研發(fā)了一種模塊小、靈敏度高、可逆性良好的新一代光遺傳學(xué)工具,為基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究,尤其是精準(zhǔn)可控的基因治療和細(xì)胞治療提供了強(qiáng)有力的新型控制系統(tǒng)。相關(guān)研究成果近日在線發(fā)表于《自然—生物技術(shù)》。

利用一束光治療疾病不再是神話故事和科幻小說中才會(huì)出現(xiàn)的情節(jié),光遺傳學(xué)的出現(xiàn),讓這個(gè)不可思議的治療手段成為可能。近年來,科學(xué)家通過對(duì)光敏蛋白的挖掘和設(shè)計(jì),構(gòu)建了一系列光遺傳學(xué)工具,并將其應(yīng)用于腫瘤及代謝疾病等治療領(lǐng)域。雖然光遺傳學(xué)工具蓬勃發(fā)展,但是要真正實(shí)現(xiàn)利用一束光治療疾病仍然需要克服許多困難。

葉海峰課題組將目光放在了擬南芥的光敏蛋白PhyA上,在紅光照射下,該蛋白能和其伴侶蛋白FHY1形成二聚體,并在遠(yuǎn)紅光照射下解離。根據(jù)這一特點(diǎn),研究人員構(gòu)建了基于PhyA-FHY1的轉(zhuǎn)錄激活系統(tǒng)。研究人員將PhyA與GAL4的DNA結(jié)合域融合表達(dá),將FHY1和轉(zhuǎn)錄激活因子VP64融合表達(dá)。紅光刺激下,PhyA-GAL4和FHY1-VP64結(jié)合形成復(fù)合體并招募RNA聚合酶,從而啟動(dòng)下游基因的表達(dá)。

起初,使用完整的PhyA并不能激活下游基因的表達(dá)。為此,研究人員對(duì)其進(jìn)行了工程改造,構(gòu)建了截短版本的ΔPhyA,并通過激活子和伴侶蛋白的優(yōu)化,.終得到了一個(gè)模塊小且高度靈敏響應(yīng)紅光的光遺傳學(xué)工具,并將其命名為REDMAP。

研究人員將ΔPhyA定位到細(xì)胞膜上,將FHY1和SOS蛋白的激活域SOScat進(jìn)行融合表達(dá),通過紅光照射來控制SOScat的細(xì)胞定位,從而實(shí)現(xiàn)了Ras/MAPK信號(hào)通路的激活和去激活,成功構(gòu)建了REDMAPSOS-Ras工具。此外,研究人員還構(gòu)建了REDMAPCas工具,將REDMAP系統(tǒng)與基因編輯工具CRISPR-dCas9結(jié)合在一起,實(shí)現(xiàn)了對(duì)哺乳動(dòng)物細(xì)胞、小鼠肝臟及肌肉內(nèi)源基因轉(zhuǎn)錄的高效調(diào)控。

同時(shí),研究人員探究了REDMAP系統(tǒng)在基因治療領(lǐng)域的能力。由于截短的ΔPhyA蛋白具有較小的尺寸,可以利用腺相關(guān)病毒包裝。因此,研究人員將REDMAP包裝至腺相關(guān)病毒中并將其注射至小鼠體內(nèi),實(shí)現(xiàn)了長達(dá)3個(gè)月以上的光控基因表達(dá)。

治療蛋白的精準(zhǔn)控制對(duì)疾病的治療具有重要意義。研究人員將裝載REDMAP系統(tǒng)的工程化細(xì)胞移植至小鼠、大鼠和兔的皮下,探究其光響應(yīng)能力。結(jié)果顯示,短時(shí)間的光照(1~5分鐘)即可誘導(dǎo)報(bào)告基因的高效表達(dá)。同時(shí),研究人員還通過光來精準(zhǔn)控制小鼠和大鼠體內(nèi)胰島素的表達(dá),成功實(shí)現(xiàn)了對(duì)糖尿病小鼠和大鼠血糖穩(wěn)態(tài)的控制。無需每天定時(shí)服用藥物或注射胰島素,只需要每天光照幾分鐘即可達(dá)到顯著降血糖的效果,這充分表明REDMAP系統(tǒng)在精準(zhǔn)可控的細(xì)胞治療領(lǐng)域具有極高的應(yīng)用潛能。(黃辛)

(——文章轉(zhuǎn)自光明網(wǎng),如有侵權(quán)請(qǐng)聯(lián)系西安橡膠制品價(jià)格的小編刪除)

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